Novel sustained-release of Stryphnodendron obovatum leaves extract using natural rubber latex as carrier

Natural rubber latex biomembranes (NRL), obtained from rubber tree Hevea brasiliensis (Willd. ex A. Juss.) Mull. Arg., have been used as sustained drug release of drugs and plant extracts with medicinal properties. The Stryphnodendron obovatum Bench (Fabaceae), popularly known as "barbatimão" has anti-inflammatory and healing properties already described in literature. Thus, the aim of this work were to study the release behavior of the hydroethanolic extract from the leaves of S. obovatum loaded in the NRL by ultraviolet­visible spectroscopy (UV-VIS). The release followed a biexponential pattern and the mechanism of release was Super Case II (n > 1). FTIR analyses did not show reaction between NRL and extract, only intermolecular interaction. From SEM was possible to observe the extract at the surface, responsible for the initial fast release, which the concentrations at 5.0 mg/mL released 2.4% and at 0.1 mg/mL released 96.8%; both reached the plateau in 7 days.

Antioxidant properties of species from the Brazilian cerrado by different assays / Avaliação da propriedade antioxidante de espécies do cerrado no Brasil detectada por diferentes ensaios

The purpose of this study was to screen the antioxidant activity of medicinal plant extracts from the Brazilian cerrado, through other methods than the total phenolic content and its correlation with the antioxidant activity. Ethanolic extracts of ten species were evaluated through three antioxidant assays, in vitro, including 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH), total antioxidant activity and reducing power; and by using the Folin-Ciocalteu method the total phenolic content was determined. Ethanolic extracts of Stryphnodendron obovatum, Cecropia pachystachya and Duguetia furfuraceae showed strong antioxidant activity (IC50<5 µg mL-1) in the DPPH free radical scavenging assay; the species Vernonia phosphorea, Hymenaea stignocarpa and Jacaranda ulei may also be highlighted. These results were confirmed in the assays of total antioxidant capacity and reducing power. The extracts of S. obovatum and V. phosphorea showed an abundant phenolic content; therefore, the phenolic content may play a role in the antioxidant activity. These two species, traditionally used in Brazil, showed great power in these assay systems and may be a promising source for the development of natural antioxidants and future candidates for phytochemical and pharmacological studies in related diseases.

O objetivo desse trabalho foi triar a atividade antioxidante de extratos de plantas medicinais do cerrado do Brasil, por outros métodos além do conteúdo de fenóis totais e sua correlação com a atividade antioxidante. Assim, o extrato etanólico de dez espécies vegetais do cerrado brasileiro foi avaliado por três ensaios de atividade antioxidante, in vitro: 2,2-difenil-1-picrilhidrazil (DPPH); atividade antioxidante total e poder redutor; e o teor de fenóis determinado pelo reagente de Folin-Ciocalteu. O extrato etanólico de Stryphnodendron obovatum, Cecropia pachystachya e Duguetia furfuraceae apresentaram forte atividade antioxidante (CI50<5 mg mL-1) no ensaio com o DPPH, tendo destaque também as espécies Vernonia phosphorea, Hymenaea stignocarpa e Jacaranda ulei. Os extratos de S. obovatum e V. phosphorea demonstraram maiores teores de fenóis, indicando que esse grupo de substâncias possa ser a responsável pela atividade antioxidante. Essas duas espécies, usadas tradicionalmente no Brasil, representam fontes promissoras para o desenvolvimento de antioxidantes naturais e futuros estudos fitoquímicos e farmacológicos em doenças relacionadas.

Antioxidant capacity of extracts and isolated compounds from Stryphnodendron obovatum Benth / Capacidade antioxidante de extratos e compostos isolados de Stryphnodendron obovatum Benth

The extract from stem bark of Stryphnodendron obovatum Benth. was chromatographed on a Sephadex® LH-20 column, and yielded nine compounds: gallic acid (GA), p-hydroxybenzoic acid (PHB), gallocatechin (GC), epigallocatechin (EPG), 4'-O-methylgallocatechin (MGC), epigallocatechin-(4β→8)-epigallocatechin (EPEP), epigallocatechin-(4β→8)-gallocatechin (EPGC), robinetinidol-(4α→8)-gallocatechin (ROGC) and robinetinidol-(4β→8)-epigallocatechin (ROEP). Evaluation of the antioxidant capacity in vitro by the methods of DPPH free radical (IC50; μg/mL) and reduction of the phosphomolybdenum complex (RAC) gave the following results, respectively: crude extract 4.52 and 0.8242; ethyl-acetate fraction 4.04 and 0.9537; aqueous fraction 5.58 and 0.9275. The crude extract and ethyl-acetate fraction were shown to possess an antioxidant capacity comparable to that of vitamin C (4.93 and 1.0). The values obtained by the DPPH free-radical method for the isolated compounds were IC50 (μM): GA=8.89; PHB=10.12; GC=16.46; EPG=13.20; MGC=21.00; EPEP=6.89; EPGC=4.91; ROGC=7.78 and ROEP=6.20. Vitamin C and trolox showed 30.11 and 30.10, respectively. Dimers showed greater activity in scavenging free radicals, possibly related to the number of hydroxyls. However, compounds without a hydroxyl at position 5 of the A-ring (5-deoxy-proanthocyanidins) did not change the antioxidant activity of the DPPH free radical, as evaluated here for the first time. Among the monomers, there appeared to be a direct relationship in scavenging of free radicals because of the stereochemistry of the compounds. The presence of a methyl radical on the B-ring significantly reduced the scavenging of free radicals of gallocatechin. All compounds showed greater scavenging of radicals than vitamin C and trolox, and these two compounds showed no significant difference from each other.

O extrato das cascas de Stryphnodendron obovatum submetido à cromatografia em coluna, Sephadex® LH-20, forneceu nove substâncias: ácido gálico (GA), ácido p-hidróxibenzóico (PHB), galocatequina (GC), epigalocatequina (EPG), 4'-O-metilgalocatequina (MGC), epigalocatequina-(4β→8)-epigalocatequina (EPEP), epigalocatequina-(4β→8)-galocatequina (EPGC), robinetinidol-(4α→8)-galocatequina (ROGC) e robinetinidol-(4β→8)-epigalocatequina (ROEP). A capacidade antioxidante in vitro pelos métodos do radical livre DPPH (IC50; μg/mL) e do complexo fosfomolibdênio (CAR) apresentou os seguintes resultados, respectivamente: extrato bruto 4,52 e 0,8242; fração acetato de etila 4,04 e 0,9537 e fração aquosa 5,58 e 0,9275 demonstrando possuírem capacidade antioxidante quando comparados com vitamina C 4,93 e 1,0. Os valores obtidos pelo método do radical livre DPPH com as substâncias isoladas foram: IC50 (μM): GA=8,89; PHB=10,12; GC=16,46; EPG=13,20; MGC=21,00; EPEP=6,89; EPGC=4,91; ROGC=7,78 e ROEP=6,20. Vitamina C e trolox mostraram valores de 30,11 e 30,10, respectivamente. Os dímeros mostraram maior atividade no sequestro de radicais livres, possivelmente relacionada com o número de hidroxilas. No entanto, substâncias com ausência de hidroxila na posição 5 do anel A (5-desoxi-proantocianidinas) não alteraram o poder antioxidante frente ao radical livre DPPH, tendo sido avaliadas aqui pela primeira vez. Entre os monômeros, parece haver uma relação direta com a estereoquímica. A presença de um radical metila no anel B reduziu significativamente a atividade da galocatequina. Todas as substâncias isoladas mostraram maior atividade do que a vitamina C e trolox, e estes não mostraram diferença significativa entre si.

Determinação quantitativa de taninos em três espécies de stryphnodendron por cromatografia líquida de alta eficiência / Quantitative determination of tannins in three species of stryphnodendron by high performance liquid chromatography

Um método de separação e quantificação por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) em fase reversa foi desenvolvido usando água (0,05 por cento de TFA):acetonitrila (0,05 por cento de TFA) como fase móvel, em sistema gradiente para a análise dos flavan-3-óis presentes em extrato semipurificado das cascas de Stryphnodendron adstringens, Stryphnodendron polyphyllum e Stryphnodendron obovatum. A CLAE foi realizada com a fração acetato de etila (FAE) sendo submetida à extração em fase sólida (cartucho C18-E) com metanol:água (2:8), filtrada por membrana de porosidade 0,5 μm; a pré-coluna e coluna empregadas foram Phenomenex® Gemini C-18 (5 μm), com esta última mantida a 30 ºC, com vazão de 0,8 mL/min e detecção a 210 nm. Utilizaram-se soluções dos padrões de ácido gálico e galocatequina para a obtenção da curva analítica. O método proposto foi validado de acordo com a resolução RE nº 899/2003 da ANVISA. A análise quantitativa da FAE das três espécies mostrou que existe similaridade no teor de galocatequina. S. adstringens possui ácido gálico em uma proporção superior a 60 por cento em relação às outras duas espécies. A metodologia desenvolvida mostrou-se viável à aplicação em plantas ricas em taninos, como nos casos de S. adstringens, S. polyphyllum e S. obovatum.

A method of separation and quantification by reverse-phase high-performance liquid chromatography (HPLC) was developed, using water (0.05 percent TFA):acetonitrile (0.05 percent TFA) as the mobile phase in a gradient system. Flavan-3-ols present in a semipurified extract from the stem bark of Stryphnodendron adstringens, Stryphnodendron polyphyllum and Stryphnodendron obovatum were analyzed. The HPLC was performed with the ethyl-acetate fraction (EAF) using a solid-phase extraction on cartridges C18-E with methanol:water (2:8), filtered through a membrane of 0.5 μm pore size; the column was Phenomenex® Gemini C-18 (5 μm) at 30 ºC, with a flow rate of 0.8 mL/min. The analysis was done at 210 nm. Gallic acid and gallocatechin solutions were used as calibration standards. The proposed method was validated by resolution RE No. 899/2003 of the National Health Surveillance Agency. Quantitative analysis of the EAF showed high contents of flavan-3-ols in the stem bark of all three species. This study demonstrated that it is possible to determine the concentration of individual substances in tannin-rich plants. The system developed can be used as a chromatographic profile for the semipurified fraction of S. adstringens, S. polyphyllum, and S. obovatum.

Avaliação de atividades biológicas das sementes de Stryphnodendron obovatum Benth. (Leguminosae) / Evaluation of biological activities of the seeds of Stryphnodendron obovatum Benth. (Leguminosae)

Stryphnodendron obovatum Benth., conhecido como "barbatimão", é uma espécie pertencente à família Leguminosae, sub-família Mimosoideae, e é amplamente distribuído em campos e cerrados. Na medicina popular, cascas de S. obovatum são usadas no tratamento de processos inflamatórios, como cicatrizante, para diarréia, frieira. Neste trabalho investigou-se a presença de proteínas e as atividades citotóxica, antibacteriana, antifúngica do extrato salino das sementes de S. obovatum. O extrato salino S. obovatum não apresentou toxidade frente ao ensaio com Artemia salina, nem mostrou atividade antibacteriana contra Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa e Escherichia coli. Na avaliação da atividade antioxidante, o extrato salino apresentou uma CE50 de 12, 193 µg/mL, enquanto a do padrão positivo BHT foi 2,98 µg/mL. O extrato salino de S. obovatum não apresentou atividade antifúngica, tanto na técnica de bioautografia com o fungo Cladosporium sphaerospermum, quanto no método de difusão em disco, realizado com Candida albicans. Foi realizado teste de atividade enzimática na qual observou-se a hidrólise do substrato H-D-Benzoil-arginina-p-nitroanilida (Bz-Arg-pNan).

Stryphnodendron obovatum Benth., popularly known as "barbatimão", belongs to the Leguminosae fami/y, of the Mimosoideae subfamily, and is present in fields and in "cerrados". S. obovatum bark is used in popular medicine for treating inflammatory processes, for healing wounds, and as cure for diarrhea and chílblain. This research investigates the presence of proteins and the cytotoxic, antifungal, antibacterial and antioxidant activities of the S. obovatum seed saline extract. The saline extract did not show cytotoxicity against Artemia salina nor any antibacterial activíty against Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa and Escherichia colí. The evaluation of the antioxidant activity showed a CEso=12.193 µg/mL, and the BHT positive pattern presented 2.98 µg/mL. The S. obovatum saline extract was tested against Cladosporium sphaerospermum and Candida albicans, using the bioautography technique and the disk diffusion method. Benzoyl­arginine-p-nitroanilide (Bz-Arg-pNan) was hydrolyzed by the saline extract.